紅外拉曼顯微鏡是一種結(jié)合紅外吸收光譜與拉曼散射光譜的顯微分析技術(shù),其技術(shù)原理與核心特點(diǎn)如下:
一、技術(shù)原理。
?紅外光譜原理?:紅外光譜基于分子振動(dòng)能級(jí)躍遷引起的紅外光吸收。當(dāng)特定波長紅外光照射樣品時(shí),分子偶極矩變化的振動(dòng)會(huì)選擇性吸收光子能量,形成特征吸收峰(如C=O、N-H鍵)。傳統(tǒng)紅外顯微鏡受衍射限制,空間分辨率僅10-20微米,但光熱紅外技術(shù)(O-PTIR)通過可見光探針檢測紅外光熱效應(yīng),突破至亞微米級(jí)分辨率。
?拉曼光譜原理?:拉曼光譜源于光子與分子之間的非彈性散射。當(dāng)入射光誘導(dǎo)分子極化率變化時(shí),散射光頻率發(fā)生偏移,偏移量對(duì)應(yīng)分子振動(dòng)能級(jí)差異。拉曼顯微鏡利用可見激光(如532nm、785nm)實(shí)現(xiàn)高分辨率(0.5微米)化學(xué)成像,適用于玻璃、金屬等紅外難測樣品。
?顯微技術(shù)整合?:通過共聚焦光學(xué)系統(tǒng)與光譜儀結(jié)合,兩種技術(shù)共享顯微鏡平臺(tái)。通過軟件切換紅外與拉曼模式,同步采集同一微區(qū)的雙模態(tài)數(shù)據(jù),提升分析效率。
二、核心特點(diǎn)
?雙模態(tài)互補(bǔ)分析?:紅外對(duì)極性官能團(tuán)(如-OH、C=O)敏感,拉曼擅長檢測共軛體系(如芳香環(huán)、C≡C鍵),兩者結(jié)合可覆蓋更廣的化學(xué)鍵振動(dòng)模式。適用于異質(zhì)材料(如聚合物共混物、微塑料)的成分分布解析及微量污染物定位。
?高空間分辨率?:紅外顯微通過O-PTIR技術(shù)將分辨率提升至500nm級(jí)別,拉曼顯微鏡利用可見光波長優(yōu)勢可達(dá)0.5μm,突破傳統(tǒng)紅外顯微的衍射極限。新型光熱顯微鏡結(jié)合受激拉曼效應(yīng),實(shí)現(xiàn)毫米級(jí)穿透深度與微米級(jí)分辨率,適用于深層生物組織成像。
?非破壞性與無標(biāo)記檢測?:無需樣品染色或切片,支持反射模式下的非接觸測量,減少污染風(fēng)險(xiǎn),適用于活細(xì)胞、文物等珍貴樣本分析。支持3D共聚焦成像,可表征多層材料或密閉容器內(nèi)部成分。
?高靈敏度與操作便捷性?:先進(jìn)濾波技術(shù)(如介電濾波)有效抑制瑞利散射干擾,提升拉曼信號(hào)信噪比。
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